组织块机械剪碎结合胰酶/胶原酶消化是获得高活力原代细胞的基础,消化时间需严格控制以避免过度损伤。
采用差速贴壁法或流式分选可有效去除成纤维细胞,提高目的细胞纯度;培养基中加入生长因子显著促进细胞附着与增殖。
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原代细胞对环境极为敏感,需维持37℃、5%CO₂稳定条件,并定期观察细胞形态,及时传代或冻存以保持生物学特性。
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