PCR引物设计:关键参数与最佳实践指南
生物技术
2026-01-12
查询: primer design
关键词:
primer design
摘要:科学合理的引物设计直接决定PCR扩增效率与特异性,是分子实验成功的基础。
引物长度建议18-25nt,Tm值控制在58-62℃,GC含量保持40%-60%,避免二聚体与发夹结构。
3'端最后5个碱基应避免连续3个相同碱基,尽量以G或C结尾以提高结合稳定性。
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利用专业软件进行多序列比对与特异性检查,可有效降低非特异扩增与引物二聚体风险。
发布时间:2026-01-12
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