首先构建报告基因质粒,将目的基因调控元件插入萤火虫荧光素酶载体中,同时准备海肾荧光素酶内参质粒。
将质粒共转染至目标细胞,培养24-48小时后,使用裂解液处理细胞,依次检测萤火虫与海肾荧光素酶活性。
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通过双报告系统计算相对活性,分析转录调控效果,该方法灵敏度高,广泛应用于基因功能研究。
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