酵母单杂交体系基于转录因子具有独立的DNA结合域和激活域原理,将目标DNA序列作为诱饵构建到最小启动子上游,连接报告基因。
待测蛋白与激活结构域融合表达,若蛋白与DNA元件结合,即可激活报告基因表达,通过营养筛选或显色反应判断互作关系。
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该技术无需蛋白纯化,直接从cDNA文库筛选结合蛋白,具有操作简便、灵敏度高的优势,适用于转录调控网络研究。
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