BiFC载体利用荧光蛋白分割为N端与C端片段,分别融合待测蛋白,当蛋白发生互作时恢复荧光,用于直观检测细胞内蛋白-蛋白相互作用。
常用Venus变体VN173/VC155系统,背景低、灵敏度高,广泛应用于植物、哺乳动物细胞互作验证,操作简便且结果可视化。
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实验中需设置阴性对照并优化融合方向与连接臂长度,以降低假阳性并确保生理条件下可靠检测。
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