流式细胞仪检测细胞凋亡的标准化操作步骤指南

细胞凋亡检测首先需制备单细胞悬液，浓度控制在1×10^6细胞/mL。使用Annexin V-FITC和碘化丙啶双染，室温孵育15分钟，避免光照。缓冲液pH值维持在7.4，确保细胞完整性。

仪器设置包括激光波长488nm激发，荧光通道FL1检测Annexin V，FL2检测PI。采集至少10,000事件，门控活细胞群。软件校准补偿，避免光谱重叠干扰。

数据分析采用FlowJo软件，区分Annexin V+/PI-早凋亡细胞和Annexin V+/PI+晚凋亡细胞。量化凋亡率，结合统计学验证结果可靠性，支持药物筛选应用。