质粒载体构建过程详解：从序列设计到转化验证的全流程指南

质粒载体构建首先涉及序列设计，选择合适的启动子、选择标记和多克隆位点，利用软件模拟重组。

其次，进行DNA片段的PCR扩增和酶切连接，使用T4连接酶组装载体，随后转化大肠杆菌。

最后，通过菌落PCR和测序验证构建成功，确保质粒稳定表达目标基因。