酵母单杂交实验步骤详解：从载体构建到转录因子筛选的完整流程

首先，构建报告基因载体。将目标DNA序列插入报告基因上游，并构建转录因子激活域融合蛋白表达载体，确保载体兼容酵母菌株。

其次，进行酵母转化。将构建好的载体导入缺陷型酵母菌株中，通过营养缺陷筛选初步阳性克隆，观察报告基因表达。

最后，验证交互。通过Western blot或报告酶活性测定确认蛋白-DNA结合特异性，避免假阳性结果。