酵母双杂交实验以酵母GAL4转录因子系统为基础,通过诱饵蛋白与猎物蛋白互作激活报告基因表达实现蛋白互作验证。
关键步骤包括诱饵载体构建、自激活检测、猎物文库转化、营养缺陷筛选及β-半乳糖苷酶活性验证。
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实验优化重点在于控制假阳性率、提高转化效率及选择适宜缺陷型酵母株系(如AH109或Y2HGold)。
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