酵母双杂交建库主要包括mRNA提取、cDNA合成、双链cDNA纯化、同源重组连接及酵母转化等核心步骤。
文库质量控制指标包括插入片段大小分布(>500bp占比)、重组率(>90%)及多样性(>10⁶独立克隆)。
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优化后的标准化建库流程可显著提高后续蛋白互作筛选效率,广泛应用于功能基因组学研究。
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