首先,进行载体设计:选择合适的启动子、选择标记和多克隆位点,使用软件模拟序列兼容性。
其次,酶切与连接:使用限制性内切酶消化载体和插入片段,T4连接酶催化连接,形成重组质粒。
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最后,转化与筛选:导入大肠杆菌,蓝白斑筛选阳性克隆,PCR验证插入序列,适用于大规模制药。
首先,进行载体设计:选择合适的启动子、选择标记和多克隆位点,使用软件模拟序列兼容性。
其次,酶切与连接:使用限制性内切酶消化载体和插入片段,T4连接酶催化连接,形成重组质粒。
最后,转化与筛选:导入大肠杆菌,蓝白斑筛选阳性克隆,PCR验证插入序列,适用于大规模制药。
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