引物扩增效率取决于Tm值匹配和GC含量(40-60%)。使用Primer3软件设计,避免二聚体形成,确保特异性扩增。
工业应用中,热启动酶结合梯度PCR可将效率提升至95%以上。监控Ct值变化,调整退火温度至最佳区间。
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在基因工程流程中,高效率引物缩短实验周期,降低成本,支持大规模生物制品制造。
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